臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞是一種來源于臍帶組織的干細(xì)胞，它是臍靜脈的重要組成細(xì)胞之一，理論上能夠進(jìn)行無限的傳代，所以進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，常選擇人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。

　　人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC），常作為內(nèi)皮細(xì)胞功能和病理學(xué)的研究模型，應(yīng)用于血管生成、愈合、血管建模、組織工程、炎癥、腫瘤等研究中。

　　人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的操作流程：

　　1.產(chǎn)科無菌取臍帶1根，置于含保鮮液的廣口試劑瓶中4℃保存（避免污染），在最短的時(shí)間內(nèi)，將臍帶攜入實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行以下操作。

　　2.在超凈工作臺或無菌層流工作臺上，將臍帶用D-Hank溶液清洗干凈，將靜脈插管插入臍靜脈中，并用絲線結(jié)扎、固定。

　　3.用20ml注射器將37℃的D-Hanks溶液注入臍靜脈，反復(fù)沖洗至清洗液無色澄清為止。

　　4.用血管鉗夾住臍靜脈的另一端，并將0.2％的Ⅰ型或Ⅱ型膠原酶（約20ml)通過靜脈插管注入臍靜脈中，至臍靜脈充盈為止（排掉靜脈管中的空氣）。

　　5.將臍帶放置在盛有37℃水的玻璃燒杯中，在37°C水浴條件下消化約20min（每5min抽吸／注入1次）。

　　6.當(dāng)酶液變成混濁時(shí)（在顯微鏡下可見大量游離細(xì)胞），將酶液在臍靜脈中反復(fù)抽吸沖打3次后，吸出并置于50ml離心管中。

　　7.細(xì)胞懸液經(jīng)350g離心5min后，棄去上清液，并用D-Hanks溶液清洗2次，然后再以350g離心5min。

　　8.棄去上清液，將細(xì)胞溶于8ml內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液(M l99 80ml、FBS 20ml、PS 1ml、L-Gln 2mM、ECGS 10mg/100ml、Heparan 4000U/1 00ml、Insulin mu/100ml)中，接種于預(yù)先包被2％明膠的T25培養(yǎng)瓶中。

　　9.細(xì)胞培養(yǎng)在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中，24h后換液，棄掉未貼壁細(xì)胞。之后每2~3d換液1次，待細(xì)胞匯合時(shí)消化傳代。