小鼠成纖維細胞分離自小鼠皮膚組織的貼壁細胞，成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細胞稱為成纖維細胞。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細胞（fibrocyte），結締組織中數(shù)目最多的細胞，相對靜止的細胞稱纖維細胞。成纖維細胞數(shù)目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細胞，細胞核呈規(guī)則的卵圓形，細胞輪廓不清，具有突起。其形態(tài)尚可依細胞的功能變化及其附著處的物理性狀不同而發(fā)生改變。纖維細胞較小，呈多角形，胞質較少，弱嗜酸性，胞核亦較小，染色較深，電鏡下粗面內質網較少，高爾基復合體不發(fā)達。

　　小鼠成纖維細胞傳代流程：

　　1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2ml0.25%EDTA的胰酶消化（注意把握消化時間，通?？刂圃?~2min）。

　　2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁運動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。

　　3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。